Il-buffer taċ-ċitrat tas-sodju jintuża għall-iżolament tar-RNA minħabba li jimminimizza l-idroliżi bażi tal-linji ta 'l-RNA. Dan jagħmilha pass importanti fil-purifikazzjoni tal-mRNA matul ir-riċerka ġenomika jew għall-istudju tat-traskrizzjoni.
Buffers ibbażati fuq iċ-ċitrat jistgħu wkoll jgħinu l-iskoperta ta 'antiġeni fi preparazzjonijiet ta' tessuti fissi minħabba li jiksru l-cross-links iffurmati bejn l-antiġeni u l-midja tat-twaħħil.
Bil-gwida t'hawn taħt, agħmel buffer taċ-ċitrat tas-sodju ta 'pH 6. L-istruzzjonijiet mhux biss huma faċli iżda mgħaġġla biex jiġu eżegwiti wkoll. Għandek tieħu biss madwar 10 minuti biex tlesti dawn il-passi.
Żewġ Għażliet biex Jagħmlu l-Bafer
Hemm żewġ modi biex titmexxa buffer taċ-ċitrat tas-sodju. L-ewwel, iddetermina jekk għandekx kemm l-aċidu ċitriku u kemm il-bażi konjugata, is-sodium citrate, biex taħdem magħhom. Jekk għandek biss l-aċidu ċitriku, mhijiex problema. Xorta tista 'tagħmel il-buffer.
Min-naħa l-oħra, jekk għandek kemm l-aċidu kif ukoll il-bażi, toħloq soluzzjoni tal-istokk ta 'kull wieħed. Ħallat 21 gramma ta 'aċidu ċitriku f'litru ta' ilma distillat, u 29.4 grammi ta 'ċitrat tas-sodju f'litru ta' ilma distillat.
Jekk għandek biss l-aċidu ċitriku, ħallat 2.1 grammi f'ftit inqas minn litru ta 'ilma distillat u pproċedi għall-istadju li jmiss.
Soluzzjonijiet ta 'Taħlit ta' Citric Acid u Sodium Citrate
Issa li ħdimt is-soluzzjoni tal-ħażna tiegħek (jekk kellek kemm aċidu kif ukoll bażi) jew inkella ħallat l-aċidu tiegħek f'ilma distillat (jekk ma kenitx), tista 'tiffoka fuq is-soluzzjonijiet tiegħek.
Ħallat 82 millilitri tat-taħlita ta 'aċidu ċitriku b'18 millilitri tas-soluzzjoni taċ-ċitrat tas-sodju.
Imbagħad, agħmel il-volum totali tat-taħlita sa ftit inqas minn litru b'ilma distillat. Ħalli biżżejjed volum biex jippermetti ż-żieda ta 'idrossidu tas-sodju (NaOH) fil-pass li jmiss.
Aġġustament tal-pH
Waqt li ħawwad bil-mod is-soluzzjoni bl-użu ta 'stirrer manjetiku, uża 1M sodium hydroxide biex taġġusta l-pH tat-taħlita għal 6.0. Wara dan, agħmel il-volum finali tas-soluzzjoni sa litru b'ilma distillat bl-użu ta 'garafina volumetrika.
Dak li għandek bżonn biex tagħmel il-Ħażna ta 'Riserva
Mhux biss mhux se tieħu inti twil ħafna biex tagħmel il-buffer taċ-ċitrat tas-sodju, inti wkoll mhux se jkollok bżonn ħafna materjali għaliha lanqas. Bl-aċidu ċitriku, 1M ta 'idrossidu tas-sodju, ilma distillat, u sonda ta' pH kalibrat, int ser tkun fin-nofs hemm. L-użu taċ-ċitrat tas-sodju huwa fakultattiv.
It-tfassil tal-buffer ikun jeħtieġ ukoll ċilindru gradwat ta 'litru, flixkun volumetriku ta' litru, u tliet fliexken tal-midja ta 'litru. Fl-aħħarnett, ikollok bzonn bar stirat manjetiku u stirrer manjetiku.
Jekk ma jkollokx dawn il-materjali kollha, tikkunsidra li tuża l-lab fl-iskola jew is-sit tax-xogħol tiegħek, sabiex ma jkollokx tixtrihom lilek innifsek. Tista 'faċilment tixtri dawn il-materjali online jew żżur maħżen ta' oġġetti speċjali fl-inħawi tiegħek.