Dawn il-buffers jistgħu jintużaw għal applikazzjonijiet bijoloġiċi f'pH li huwa kważi newtrali
It-tliet valuri pKa għall-aċidu fosforiku (mill-KM Handbook of Chemistry and Physics) huma 2.16, 7.21 u 12.32. Il-fosfat monosodiku u l-bażi konjugata tiegħu, il-fosfat tad-disodju ġeneralment jintużaw biex jiġġeneraw buffers ta 'valuri ta' pH ta 'madwar 7, għal applikazzjonijiet bijoloġiċi, kif muri hawn.
Nagħmlu dan il-buffer daqsxejn iktar diffiċli milli nagħmlu buffers TAE u TBE. Mhuwiex estremament iebes, madankollu. Sempliċement medja. Għandha tieħu madwar 10 minuti biex taqbad dan il-buffer. Hawn kif.
1. Iddeċiedi fuq il-Proprjetajiet ta 'Riserva
Qabel ma tagħmel buffer, l-ewwel trid tkun taf x'inhuma l-molarità li trid tkun, liema volum trid tagħmel u x'inhu l-pH mixtieq. Il-biċċa l-kbira tal-buffers jaħdmu bl-aħjar mod f'konċentrazzjonijiet bejn 0.1 M u 10 M. Il-pH għandu jkun f'unità ta 'pH ta' 1 aċidu / konjugat bażi pKa. Għas-sempliċità, dan il-kalkolu tal-kampjun se jkun għal litru ta 'buffer.
2. Iddetermina l-Proporzjon ta 'Aċidu għal Bażi
Uża l-ekwazzjoni Henderson-Hasselbalch (hawn taħt) biex tiddetermina liema proporzjon ta 'aċidu għal bażi huwa meħtieġ biex jagħmel buffer tal-pH mixtieq. Uża l-valur ta 'pKa l-eqreb il-pH mixtieq tiegħek u l-proporzjon se jirreferi għall-par konjugat aċidu-bażi li jikkorrispondi għal dik il-pKa.
HH Ekwazzjoni: pH = pKa + log ([Bażi] / [Aċidu])
Għal buffer ta 'pH 6.9, [Bażi] / [Aċidu] = 0.4898
Sostitut għal [Acid] u Solve għal [Bażi]
Il-molarità mixtieqa tal-buffer hija s-somma ta '[Aċidu] + [Bażi].
Għal buffer 1M, [Bażi] + [Aċidu] = 1 u [Bażi] = 1 - [Acid]
Billi tissostitwixxi dan fil-proporzjon ekwazzjoni, mill-istadju 2, ikollok:
[Acid] = 0.6712 moles / L
Issolvi għal [Acid]
Uża l-ekwazzjoni: [Bażi] = 1 - [Aċidu], tista 'tikkalkula li:
[Bażi] = 0.3288 moles / L
3. Ħallat il-Bażi ta 'Aċidu u Konjugat
Wara li tkun użajt l-ekwazzjoni Henderson-Hasselbalch biex tikkalkula liema proporzjon ta 'aċidu għal bażi hija meħtieġa għall-buffer tiegħek, ipprepara ftit inqas minn litru ta' soluzzjoni bl-użu ta 'ammonti korretti ta' fosfat monosodju u disodium phosphate.
4. Iċċekkja l-pH
Uża sonda tal-pH biex tikkonferma li tintlaħaq il-pH korretta għall-buffer. Aġġusta kemm kemm kemm hu meħtieġ bl-użu ta 'aċidu fosforiku jew idrossidu tas-sodju (NaOH).
5. Ikkoreġi l-Volum
Ladarba jintlaħaq il-pH mixtieq, ġib il-volum ta 'buffer għal 1 litru. Imbagħad iddilwa l-buffer kif mixtieq. Dan l-istess buffer jista 'jiġi dilwit biex joħloq buffers ta' 0.5 M, 0.1 M, 0.05 M jew xejn bejniethom.
6. Għajnuniet għall-Baffer
Ftakar li pKa mhijiex faċilment imkejla għal valur eżatt. Jista 'jkun hemm xi ftit valuri differenti fil-letteratura minn sorsi differenti.
7. Dak li għandek bżonn
Biex tagħmel il-buffer, għandek bżonn tliet sustanzi, filwaqt li l-materjali li jifdal huma tagħmir. Is-sustanzi huma fosfat monosodju, fosfat tad-disodju, u aċidu fosforiku jew sodium hydroxide biex jaġġustaw il-pH.
Int ser ikollok bżonn ukoll meter tal-pH u sonda u labware xieraq. Dan jinkludi flixkun volumetriku, ċilindri gradwati, beakers u ħawwad.
Fl-aħħarnett, ikollok bzonn hotplate li tħawwad.