Hemm diversi tbajja differenti li jistgħu jintużaw biex iħarsu u jiskopru d- DNA wara li l-materjal ikun ġie sseparat permezz ta 'elettroforeżi tal-ġell. Fost il-bosta għażliet, dawn il-ħames razez huma l-iktar bidu komuni b'Ethidium bromide, li huwa l-aktar użat. Meta taħdem ma 'dan il-proċess, huwa importanti li mhux biss ikunu jafu d-differenzi bejn ir-razez imma r-riskji inerenti għas-saħħa.
01 Bromur ta 'l-Etidju
Il-bromur ta 'l-etidju x'aktarx huwa l-aktar kulur magħruf użat għall-viżwalizzazzjoni tad-DNA. Dan iż-żebgħa jista 'jintuża fit-taħlita tal-ġell, fil- buffer ta' l-elettroforeżi jew biex tebgħa l-ġell wara li titħaddem. Il-molekuli taż-żebgħa jaderixxu mal-linji tad-DNA u jiffluworixxu taħt dawl UV, u jurik eżattament fejn il-meded huma ġol-ġell. Minkejja l-vantaġġ tiegħu, l-iżvantaġġ huwa li l-bromur ta 'l-etidju huwa karċinoġenu potenzjali, għalhekk għandu jiġi ttrattat b'attenzjoni kbira. Minħabba r-riskji potenzjali għas-saħħa ta 'xogħol ma' dan il-ġel, instabu alternattivi. 02 SYBR Deheb
Jista 'jintuża żebgħa tad-deheb SYBR biex tebgħa DNA doppju jew stranded, jew biex tebgħa l-RNA. SYBR Gold kien wieħed mill-ewwel alternattivi għall-ethidium bromide li tolqot is-suq u huwa meqjus bħala iktar sensittiv minn bromur ta 'l-ethidium. Iż-żebgħa turi fluworexxenza UV ta '1000 darba akbar ladarba tkun marbuta ma' aċidi nukleiċi. Imbagħad jippenetra ġellijiet ta 'agarose perċentwali oħxon u għoli u jista' jintuża f'gels tal-formaldehyde. Minħabba li l-fluworexxenza tal-molekula mhux illokkata hija tant baxxa, mhux meħtieġ li tinżamm. Id-detentur tal-liċenzja Molekulari Probes ukoll (mit-tnedija ta 'SYBR Gold) żviluppaw u kkummerċjalizzaw SYBR Safe u SYBR Green li huma alternattivi aktar sikuri għall-bromur tal-etidju.
03 SYBR Aħdar
It-tbajja 'ta' SYBR Green I u II (għal darb'oħra, ikkummerċjalizzati minn Sondi Molekulari) huma ottimizzati għal skopijiet differenti. Minħabba li jorbtu mad-DNA, għadhom jitqiesu bħala mutaġeni potenzjali u minħabba f'hekk, għandhom jiġu mmaniġġjati b'attenzjoni. SYBR Green I huwa iktar sensittiv għall-użu b'DNA doppju, filwaqt li SYBR Green II, min-naħa l-oħra, huwa l-aħjar għall-użu b'DNA jew RNA ta 'ċomb wieħed. Bħall-tebgħa popolari Ethidium Bromide, dawn it-tebgħat sensittivi ħafna jiffluworixxu taħt dawl UV. 04 SYBR Safe
SYBR Safe kien iddisinjat biex ikun alternattiva aktar sikura għal Ethidium Bromide u tbajja oħra ta 'SYBR. Mhuwiex ikkunsidrat bħala skart perikoluż u ġeneralment jista 'jintrema permezz tas-sistemi tad-dranaġġ regolari (jiġifieri fl-iskariku), minħabba li l-ittestjar tat-tossiċità jindika li m'hemm l-ebda tossiċità akuta. L-ittestjar jindika wkoll li hemm ftit jew xejn ġenotossiċità fuq ċelluli ta 'embriju Sirjan Hamster (SHE), limfoċiti umani, ċelluli tal-limfoma tal-ġurdien, u fit-test AMES. It-tebgħa tista 'tintuża b'transilluminatur blu-dawl li jikkawża inqas ħsara għad-DNA li qed jiġi viżwalizzat u toffri effiċjenza aħjar għall-klonazzjoni ta' wara. 05 Eva Green
Eva Green huwa żebgħa fluworexxenti aħdar li nstab li jinibixxi PCR f'livell inqas minn żebgħa oħra. Dan jagħmilha utli ħafna għal applikazzjonijiet bħal PCR kwantitattiva f'ħin reali. Hija wkoll għażla tajba jekk qed tuża ġellijiet b'livell baxx ta 'tidwib għall-irkupru tad-DNA. Huwa stabbli ħafna f'temperaturi għoljin u għandu fluworexxenza baxxa ħafna waħdu, iżda huwa ferm fluworexxenti meta marbut mad-DNA. Eva Green intwera wkoll li kellu ċitotossiċità jew mutaġeniċità baxxa ħafna jew l-ebda.