Imsejħa wkoll bħala RFLP Analysis, it-teknika tisfrutta l- polimorfiżmi fil-kodiċijiet ġenetiċi tan-nies individwali. Għalkemm il-membri kollha ta 'speċi għandhom essenzjalment l-istess għamla ġenetika, dawn id-differenzi żgħar jammontaw għal varjazzjonijiet fil-fenotip, bħal apparenza jew metaboliżmu, bejn individwi.
RFLP: Teknika ta 'Analiżi u Applikazzjonijiet
It-teknika tal-analiżi tal-RFLP tinvolvi t-tqattigħ ta 'reġjun partikolari ta' DNA b'varjabilità magħrufa, b'enżimi ta 'restrizzjoni, imbagħad tissepara l-frammenti tad-DNA b'elaproforesi fil-ġell agarose u tiddetermina n-numru ta' frammenti u qisien relattivi.
Enzima ta 'restrizzjoni hija enzima, molekula ta' proteina, li tnaqqas id-DNA f'siti ta 'restrizzjoni. Essenzjalment, il-kampjun tad-DNA jinqasam u jiġi diġerit mill-enżimi ta 'restrizzjoni. Il-frammenti li jirriżultaw huma separati skont it-tul tagħhom u l-mudell tad-daqsijiet tal-frammenti se jkun differenti għal kull individwu ttestjat.
Il-proċess RFLP sħiħ jeħtieġ tikkettar tas-sonda, frammentazzjoni tad-DNA, elettroforeżi, taħlit, ibridizzazzjoni, ħasil, u awtoradjogramma. L-RFLP misjuba hija viżwalizzata bl-użu ta 'film tar-raġġi-X f'awtoradiografija, fejn frammenti tad-DNA jistgħu jitqiesu u jiġu analizzati wara li jkunu separati minn xulxin permezz ta' elettroforeżi.
Uħud mill-applikazzjonijiet għall-analiżi RFLP jinkludu:
- Immarkar tal-marki tad-DNA . Ix-xjentisti forensiċi jistgħu jużaw analiżi RFLP biex jidentifikaw suspettati bbażati fuq kampjuni ta 'evidenza miġbura f'xeni ta' reati.
- Paternità. L-RFLP tintuża wkoll fid-determinazzjoni tal-paternità jew għat-traċċar ta 'l-antenati.
- Diversità ġenetika. It-teknika tista 'tintuża fl-istudju tal-evoluzzjoni u l-migrazzjoni tal-ħajja selvaġġa, l-istudju tax-xejriet tat-tgħammir fil-popolazzjonijiet tal-annimali u fil-kxif u d-dijanjosi ta' ċertu mard.
It-teknika tal-użu tal-iskoperta tal-RFLP tal-varjazzjoni fil-ġenomi hija għodda vitali fl-analiżi tal-ġenomi u l-analiżi tal-mard ġenetiku. Jekk il-post ta 'ġene ta' marda partikolari qed jiġi mfittex f'ċertu kromożomi, allura r-riċerkaturi janalizzaw id-DNA tal-membri ta 'familja mal-marda, imbagħad ifittxu mudelli simili ta' wirt f'alel RFLP.
Ladarba ġene tal-marda jkun lokalizzat, it-twettiq ta 'analiżi RFLP fuq membri oħra tal-familja jista' jiżvela trasportatur tal-ġeni mutanti jew riskju ta 'mard globali tas-sinjal. Huwa importanti li wieħed jinnota li t-teknika RFLP mhix użata ħafna issa li jintużaw tekniki aktar ġodda u aktar b'saħħithom għall-analiżi tad-DNA fix-xjenza forensika u f'diversi oqsma oħra.
Aspett negattiv tal-Analiżi
Sfortunatament, it-teknika tal-analiżi tal-RFLP hija tedjanti u bil-mod. Apparti milli teħtieġ ammont kbir ta 'DNA tal-kampjun - il-kampjun normalment ikollu jkun madwar id-daqs ta' kwart, li huwa relattivament kbir għal kampjuni tad-DNA - il-proċess, minn tikkettar b'sonda għal ħasil u awtoradjogramma, jista ' xahar sħiħ biex jitlesta.
Ir-riżultati mill-Proġett tal-Ġenoma tal-Bniedem sostitwew pjuttost il-ħtieġa għal RFLP. Il-proġett ippermetta li tiġi ddeterminata s-sekwenza sħiħa tad-DNA misjuba fiċ-ċelloli umani, il-ġenoma tal-bniedem, u għall-identifikazzjoni tal-ġeni kollha fil-ġenoma tal-bniedem.